技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2026-116
在高通量實驗、并行反應和條件篩選中,研究人員通常會重點關(guān)注反應體系本身,例如溶劑、試劑比例或反應條件設置,而對反應體系的密封方式關(guān)注不足。事實上,在多孔板實驗中,密封材料往往直接影響實驗的重復性和數(shù)據(jù)可靠性。尤其是在使用有機溶劑、易揮發(fā)試劑或進行長時間反應時,密封不當極易引發(fā)一系列問題。高通量實驗中,密封環(huán)節(jié)常見的三大問題1.溶劑揮發(fā)導致條件漂移在圓孔(RoundWell)多孔板中,如果封膜對溶劑阻隔能力不足,不同孔位的溶劑揮發(fā)速率會產(chǎn)生差異,直接影響反應濃度和反應速率。2....
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2026-116
CRISPR/Cas9技術(shù)的成熟,使基因編輯逐漸從模式細胞系走向原代細胞和臨床相關(guān)細胞模型。然而,在實際操作中,許多實驗人員很快會遇到一個現(xiàn)實問題:CRISPR體系本身并不難,難的是如何把它高效、溫和地送進原代細胞。在這一背景下,電轉(zhuǎn)染逐漸成為原代細胞CRISPR實驗中的主流選擇之一。一、CRISPR/Cas9在原代細胞中的遞送難點與常規(guī)細胞系相比,原代細胞在進行CRISPR編輯時往往面臨多重挑戰(zhàn):對外界刺激高度敏感轉(zhuǎn)染后細胞存活率要求高編輯效率需要穩(wěn)定、可重復遞送時間過長可...
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2026-112
在細菌培養(yǎng)、蛋白表達和生長狀態(tài)判斷中,OD600是實驗室常用、也是最容易被“想當然”的指標之一。一個被頻繁問到的問題是:OD600能不能用超微量分光光度計來測?會不會不準?答案并不是簡單的“能”或“不能”,而是:取決于你“為什么測OD600”,以及“你需要它來做什么判斷”。一、先說結(jié)論?可以用超微量分光光度計測OD600?但并不是所有OD600場景都適合如果不區(qū)分使用場景,就容易出現(xiàn)兩種認知:一種覺得“超微量測OD600都不靠譜”另一種覺得“只要能出數(shù)就行”這兩種看法都不完整...
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2026-15
在基因編輯、細胞功能研究和轉(zhuǎn)化醫(yī)學實驗中,原代細胞轉(zhuǎn)染始終是一個繞不開的技術(shù)難點。不少實驗人員都有類似經(jīng)歷:在常規(guī)細胞系中效果良好的轉(zhuǎn)染方案,一旦應用到原代細胞中,轉(zhuǎn)染效率明顯下降,甚至伴隨嚴重的細胞死亡。那么,原代細胞轉(zhuǎn)染失敗的原因究竟在哪里?一、原代細胞與常規(guī)細胞系的本質(zhì)差異與HEK293、HeLa等永生化細胞系相比,原代細胞通常具有以下特點:內(nèi)吞活性較低對外界刺激高度敏感對培養(yǎng)條件依賴性強修復能力有限這意味著:??原代細胞并不“適合”依賴內(nèi)吞機制的轉(zhuǎn)染方式。二、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)...
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2026-15
在基因編輯、細胞治療和免疫研究中,高效、低損傷的細胞轉(zhuǎn)染始終是實驗成功的關(guān)鍵步驟之一。然而,許多實驗人員都有相同的困擾:脂質(zhì)體在常規(guī)細胞系中效果尚可,但一遇到原代細胞、干細胞或免疫細胞,轉(zhuǎn)染效率和細胞存活率往往難以兼顧。針對這一難題,基于微量電轉(zhuǎn)染(Microporation)技術(shù)的ExTransfection™電轉(zhuǎn)染系統(tǒng),正在成為越來越多實驗室的選擇。一、為什么傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染方法在原代細胞中頻頻失效?1??脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的天然局限脂質(zhì)體依賴細胞的內(nèi)吞機制,而原代細胞、T細...
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